Koningin Margrethe is geboren op 16 april 1940 in Amalienborg te Kopenhagen als dochter van koning Frederik IX (1899-1972) en koningin Ingrid (1910-2000). Margrethe heeft twee jongere zussen, prinses Benedikte (1944) en prinses Anne-Marie (1946). Ze wordt gedoopt op 14 mei 1940 in de Holmenskerk in Kopenhagen.

Margrethe verlooft zich in oktober 1966 met de Fransman Henri de Laborde de Monpezat (1934-2018). Ze trouwen op 10 juni 1967 in de Holmenskerk in Kopenhagen. Het paar krijgt twee kinderen, prins Frederik (1968) en prins Joachim (1969). Op 31-jarige leeftijd volgt Margrethe haar overleden vader op. Ze is sinds 16 januari 1972 koningin van Denemarken.

In de zomer van 2017 maakt het Deense Hof bekend dat prins Henrik lijdt aan Alzheimer. De echtgenoot van koningin Margrethe overlijdt op 13 februari 2018.

Koningin Margrethe heeft acht kleinkinderen: graaf Nikolai (1999), graaf Felix (2002), prins Christian (2005), prinses Isabella (2007), graaf Henrik (2009), de tweeling prins Vincent en prinses Josephine (2011) en gravin Athena (2012).

Op 14 januari 2024 doet koningin Margrethe afstand van de troon, haar zoon Frederik volgt haar op.