Diana is geboren op 1 juli 1961 in Sandringham als dochter van Frances Ruth Burke-Roche en Edward John Spencer. Ze heeft twee zussen, Sarah en Jane, en een broer, Charles. Haar peetouders zijn: John Floyd, Alexander Gilmour, Lady Mary Colman, Sarah Pratt en Carol Fox. 

Op 24 februari 1981 verloofde Diana zich met prins Charles. Het paar trouwde op 29 juli 1981 in de St. Pauls Cathedral. Samen kregen ze twee zoons: prins William (1982) en prins Harry (1984). Ook hebben ze vijf kleinkinderen: George (2013), Charlotte (2015), Louis (2018), Archie (2019) en Lilibet (2021). Het paar ging uiteindelijk uit elkaar en de scheiding was op 28 augustus 1996 officieel.

Prinses Diana overleed op 31 augustus 1997 tijdens een auto ongeluk in Parijs samen met haar vriend Dodi Al-Fayed. Haar dood was een schok en zorgde voor een publieke rouwperiode. Ze lag opgebaard in de koninklijke kapel van St. James Palace. Op 6 september 1997 vond de uitvaartplechtigheid plaats waar heel veel mensen op afkwamen en in veel landen live werd uitgezonden op televisie. Diana is begraven in Althorp op een eiland in het midden van een meer op het landgoed van haar broer.